Verschließen der PCR-Gefäße mit optischer Abdeckfolie oder Deckel, ggf. anzentrifugieren.
In der Geräte-Software bitte folgende Einstellungen für Reporter und Quencher verwenden:
1 abhängig von der möglichen Einstellung am jeweiligen Gerät 2 interne Referenz bei Verwendung von ABI PRISM® Sequence Detection Systems
www.lab-leipzig.deSpin shortly if necessary.
Use the following settings for reporter and quencher in the software of your thermal cycler:
1 use option available in your thermal cycler 2 internal reference using the ABI PRISM® Sequence Detection Systems
www.lab-leipzig.deDiese Sonden sind, vergleichbar den Primern, kurze Oligonukleotidstücke, deren Sequenz komplementär zu einem Abschnitt auf dem, durch die PCR amplifizierten Sequenzstück liegt.
Zusätzlich ist an dieses Molekül ein Fluoreszensfarbstoff (Fluorophor) und ein sogenannter Quencher gekoppelt.
Der Quencher unterdrückt die fluoreszierenden Eigenschaften des Fluorophors solange er sich in dessen unmittelbarer Nähe befindet.
www.congen.deSimilar to primers, the probes are short oligonucleotides which sequence is complementary to a section on the amplified DNA fragment.
Additionally, a fluorescing molecule (fluorophor) and a so called quencher are bound to the probe.
When in close local relation, the quencher inhibits the fluorescence effect of the fluorophor.
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